Introduktion til ELISA-teknologi
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) er en meget anvendt analytisk teknik inden for molekylærbiologi og immunologi til kvantitativ måling af specifikke proteiner i forskellige biologiske prøver. Disse prøver kan omfatte serum, plasma, cellekultursupernatanter, urin og vævslysater. AREX Biosciences er forpligtet til at levere ELISA-kits af høj kvalitet, der letter påvisning og kvantificering af målproteiner med enestående specificitet og følsomhed. Vores innovative løsninger imødekommer behovene hos forskere og klinikere, hvilket gør dem uvurderlige i både forskning og kliniske anvendelser.
Oversigt over ELISA Metodologi
ELISA-processen involverer flere nøgletrin til nøjagtig måling af målproteiner. Indledningsvis immobiliseres et specifikt indfangningsantistof på en 96-brønds plade. Herefter tilsættes standarder og prøver til brøndene, hvor målproteinet binder til det immobiliserede antistof. Brøndene vaskes derefter for at fjerne ubundne stoffer, efterfulgt af tilsætning af et biotinyleret detektionsantistof, der specifikt genkender målproteinet. Efter endnu et vasketrin tilsættes HRP-konjugeret streptavidin for at lette påvisningen.
Udvikling af Signal
Efter tilsætning af HRP-konjugeret streptavidin gennemgår brøndene en sidste vask, før en TMB-substratopløsning indføres. Substratet reagerer med HRP-enzymet for at producere en farve, der er direkte proportional med mængden af målprotein bundet til brøndene. Denne farveudvikling er et kritisk aspekt af analysen, som giver forskere mulighed for at visualisere og kvantificere målproteinet effektivt. AREX sikrer, at alle komponenter i deres ELISA-sæt er optimeret til pålidelig ydeevne, hvilket bidrager til nøjagtige resultater i proteinanalyse.
Typer af ELISA
Der er fire hovedtyper af ELISA: direkte, indirekte, sandwich og konkurrerende, hver med forskellige fordele og ulemper.
- Direkte ELISA: I denne type immobiliseres et antigen på pladen, og et konjugeret detektionsantistof binder sig direkte til det. Denne metode er hurtig og enkel, men mindre specifik på grund af brugen af kun ét antistof.
- Indirekte ELISA: Denne variation inkluderer et yderligere amplifikationsdetektionstrin, hvor et ukonjugeret primært antistof tilsættes først, efterfulgt af et konjugeret sekundært antistof. Denne tilgang giver mulighed for forstærkning af signalet, men kan introducere potentiel krydsreaktivitet.
- Sandwich ELISA: Den mest almindelige type, denne metode anvender to antistoffer til at "sandwich" antigenet. Det giver den højeste specificitet og sensitivitet, men involverer en længere protokol og kan være mere udfordrende at udvikle. AREX's sandwich ELISA-sæt er designet til at maksimere ydeevnen og give forskere et pålideligt værktøj til deres analyser.