مجموعة ELISA البشرية - MMP-9

تشكل البروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs)، والتي تسمى أيضًا المصفوفات، عائلة من الإندوببتيداز المعتمدة على الزنك والكالسيوم والتي تعمل في انهيار المصفوفة خارج الخلية (ECM) وفي معالجة مجموعة متنوعة من الجزيئات في بيئات تحت خلوية مختلفة. أنها تلعب دورا هاما في العديد من العمليات الفسيولوجية الطبيعية مثل التطور الجنيني، والتشكل، والتكاثر، وإعادة تشكيل الأنسجة. كما أنها تشارك في اضطرابات الالتهابات والمناعة الذاتية مثل التهاب المفاصل والسرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية. في حين يتم تنظيم كميات MMPs المصنعة حديثًا بشكل رئيسي على مستويات النسخ، يتم التحكم في أنشطة التحلل البروتيني لـ MMPs الموجودة من خلال تنشيط الإنزيمات الأولية أو مولدات الإنزيم وتثبيط الإنزيمات النشطة بواسطة مثبطات داخلية، ألفا 2-ماكروجلوبيولين، ومثبطات الأنسجة للبروتينات المعدنية (TIMPs). - يتم إفراز MMP-9 (يشار إليه أيضًا باسم جيلاتيناز B، كولاجيناز 92 كيلو دالتون من النوع الرابع، جيلاتيناز 92 كيلو دالتون، وكولاجيناز من النوع الخامس) باعتباره إنزيمًا أوليًا غليكوزيلاتي. يتضمن تنشيط الإنزيم الأولي الإزالة البروتينية للمنطقة الاحترافية N-terminal، مما ينتج عنه الإنزيم النشط بقدرة 82 كيلو دالتون. يشترك MMP-9 البشري النشط في هوية تسلسل الأحماض الأمينية بنسبة 72% و74% مع الماوس والجرذ MMP-9، على التوالي. بالإضافة إلى موقع ربط الزنك، يحتوي المجال التحفيزي أيضًا على ثلاث وحدات متماثلة من النوع الثاني من الفيبرونكتين مسؤولة عن ربط الجيلاتين. تربط المنطقة المفصلية الغنية بالبرولين المجال التحفيزي بالمجال الشبيه بالهيموبكسين الطرفي C-. لا تنتج المعالجة المختبرية للإنزيم الأولي باستخدام أسيتات أمينوفينيل الزئبق 4 (APMA) الإنزيم النشط فحسب، بل تنتج أيضًا شكل C-طرفي مقطوع مع نشاط مماثل لنشاط الشكل النشط. MMP - 9 يتحلل مكونات ECM مع نشاط محدد عالي للكولاجين المشوه (الجيلاتين). يمكنه تقطيع الكولاجين الأصلي من النوع III، IV، V، وXI، بالإضافة إلى Elastin، Nidogen-1، وVitronectin. يمكن لـ MMP-9 أيضًا أن يقطع مجموعة متنوعة من المركبات الكيميائية وعوامل النمو (مثل IL-1 بيتا، CXCL8/IL-8، CXCL7، CXCL4، CXCL1، TGF-beta الكامن، TNF-alpha، VEGF، وFGF الأساسي)، وببتيد بيتا الأميلويد، والمادة P، وبروتين المايلين الأساسي. يمكن لهذا الإجراء أن يزيد أو يقلل من النشاط البيولوجي للعوامل القابلة للذوبان ويمكنه أيضًا تحريرها من الارتباط مع ECM. يمكن لـ MMP-9 أيضًا تحفيز الإشارة عبر بروتينات عبر الغشاء المختلفة أو تثبيط الإشارة عن طريق حث تساقطها من سطح الخلية (مثل CD44 وE-Cadherin وIntegrins وICAM-1 وIL-2 R alpha).
يتم إنتاج MMP-9 بواسطة مجموعة متنوعة من الخلايا الطبيعية والمتحولة بما في ذلك العدلات، والخلايا الوحيدة، والبلاعم، والخلايا النجمية، والخلايا الليفية، والخلايا العظمية، والخلايا الغضروفية، والخلايا الكيراتينية، والخلايا البطانية والظهارية. يمارس تأثيرات وعائية وفسيولوجية ومرضية على الأوعية الدموية. تطلق العدلات المنشطة proMMP-9 الخالي من TIMP-1، مما يسمح بتحرير FGF-2 المولد الوعائي من ECM. لا يؤدي دمج MMP-9 مع TIMP-1 إلى إطلاق FGF-2. تؤدي العدلات-المشتقة من MMP-9 إلى تفاقم الاستجابة الالتهابية، جزئيًا عن طريق توليد الببتيدات المشتقة من الكولاجين والتي تحفز إطلاق العدلات الإضافية MMP9. يلعب MMP-9 أيضًا دورًا في تكوين العظام وإعادة تشكيلها، والتوعية السلوكية الناجمة عن الميثامفيتامين والمكافأة، وتنظيم إعادة تشكيل المشبك العصبي، وغزو الأرومة الغاذية أثناء الزرع، وتعطيل نشاط مثبط بروتيناز Serpin alpha 1. إن تساقط بروتينات الالتصاق بواسطة MMP - 9 له تأثير مباشر على غزو الخلايا السرطانية.
تزداد مستويات الدورة الدموية لـ MMP-9 في العديد من الاضطرابات الالتهابية بما في ذلك تكوين الخثرة داخل اللمعة، وتصلب الشرايين، ومرض كرون، وعدوى فيروس التهاب الكبد C، وسرطان القولون والمستقيم، والحثل العضلي الدوشيني. تزداد أيضًا نسبة MMP-9 إلى TIMP-1 في مصل التصلب المتعدد والتليف الكيسي في البلغم، ولكنها تنخفض في المصل أثناء الإصابة بالفيروس المضخم للخلايا. مستويات MMP-9 الحرة ومجمعات MMP-9 مع Lipocalin-2/NGAL مرتفعة في بول مرضى سرطان المبيض وعدوى المسالك الرحمية، على التوالي.

صفحة / مل	التطوير التنظيمي		متوسط	تصحيح
0.00	0.0143	0.0140	0.0142
13.72	0.0212	0.0210	0.0211	0.007
41.15	0.0331	0.0334	0.0333	0.0191
123.46	0.0712	0.0673	0.0693	0.0551
370.37	0.1812	0.1728	0.1770	0.1629
1111.11	0.4692	0.4776	0.4734	0.4593
3333.33	1.2325	1.1987	1.2156	1.2015
10000.00	2.7141	2.6355	2.6748	2.6607

	داخل - دقة الفحص			بين - دقة الفحص
رقم العينة	S1	S2	S3	S1	S2	S3
	22	22	22	6	6	6
متوسط (جزء/مل)	225.2	1135.8	3363.1	234	1080.9	3328.7
الانحراف المعياري	6.4	58.6	182.6	12.3	16.5	111.9
معامل التغير(%)	2.8	5.2	5.4	5.3	1.5	3.4

الدقة داخل الاختبار (الدقة داخل الاختبار) تم اختبار ثلاث عينات ذات تركيز معروف عشرين مرة على لوحة واحدة لتقييم دقة الاختبار داخل الاختبار.

الدقة بين المقايسات (الدقة بين المقايسات) تم اختبار ثلاث عينات ذات تركيز معروف ست مرات على لوحة واحدة لتقييم دقة المقايسة.

تم تقييم تعافي الارتفاع عن طريق إضافة 3 مستويات من MMP-9 البشري إلى عينة مصل بشري صحي. تم استخدام المصل غير المسنن كفارغ في هذه التجربة.
وتراوحت نسبة التعافي من 89% إلى 114% مع متوسط استرداد إجمالي قدره 101%.

مصفوفة العينة	تم تقييم العينة	النطاق (جزء/مل)	قابل للاكتشاف (%)	متوسط الكشف (جزء/مل)
مصل	30	203.3-765.1	100	428.1

المصل/البلازما - تم تقييم ثلاثين عينة من متطوعين يتمتعون بصحة جيدة للتأكد من وجود HGF في هذا الاختبار. لم يكن هناك تاريخ طبي متاح للجهات المانحة.