مجموعة CCL5 البشرية/RANTES ELISA
كتيب البروتوكول
الميزات والتفاصيل الرئيسية
- المواصفات:
- الحساسية:
- نطاق المنحنى القياسي:
- التدرج المنحني القياسي:
- عدد الحضانات:
- حجم العينة:
- نوع الفحص:
- مدة العملية:
-
العلامة التجارية:
رقم القط. : AEH0027
دولار أمريكي يرجى الاختيار
دولار أمريكي يرجى الاختيار
الحجم:
المسار أو الحجم السائب أو الطلبات المخصصة يرجى الاتصال بنا
تفاصيل المنتج
الخلفية
RANTES (تُنظم عند التنشيط، ويتم التعبير عن الخلايا التائية العادية ويُفترض أنها مُفرزة)، والمعروفة أيضًا باسم CCL5، وهي عضو في فصيلة "CC" الفرعية من المركبات الكيميائية. إنه يلعب دورًا أساسيًا في الاستجابة المناعية الالتهابية من خلال قدرته على جذب الكريات البيض كيميائيًا وتعديل وظيفتها. تم اكتشاف [كدنا] لـ RANTES في البداية عن طريق التهجين الطرحي كتسلسل محدد للخلية التائية. يقوم الإنسان RANTES cDNA بتشفير 91 حمض أميني (أأ) سلائف ببتيد متبقي للغاية مع ببتيد إشارة مسعور 23 أأ مشقوق لتوليد البروتين الناضج 68 أأ. يُظهر RANTES البشري تماثلًا بنسبة 85% تقريبًا مع RANTES بالماوس على مستوى أأ المستنتج.
RANTES هو جاذب كيميائي قوي لعدد من أنواع الخلايا المختلفة بما في ذلك خلايا الذاكرة التائية CD4+/CD45RO+ غير المحفزة وخلايا CD4+ وCD8+ T المحفزة ذات الأنماط الظاهرية الساذجة والذاكرة، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا القاعدية، والحمضات، والخلايا الجذعية، والخلايا البدينة، والخلايا الوحيدة، والخلايا الدبقية الصغيرة. بالإضافة إلى آثاره على الهجرة، يمكن لـ RANTES تنشيط عدد من أنواع الخلايا بما في ذلك الخلايا التائية، والخلايا الوحيدة، والعدلات، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا الجذعية، والخلايا النجمية. يتطلب تنشيط الخلايا التائية عمومًا تركيزات RANTES عالية نسبيًا (~ 1 ميكرومتر) ويعتمد على تجميع الجزيء والارتباط مع جليكوسامينوجليكان سطح الخلية (GAGs). ما إذا كان هذا [فقد بعض الكلمات، ربما "يحدث النشاط في الجسم الحي"] لا يزال غير واضح على الرغم من أن طفرات RANTES المحقونة داخل الصفاق والتي لا تستطيع تجميع و/أو ربط GAG، غير قادرة على جذب كريات الدم البيضاء عند مقارنتها بعناصر التحكم من النوع البري. تظهر دراسات أخرى أجريت على الجسم الحي أن فئران RANTES بالضربة القاضية تظهر نقصًا في تجنيد خلايا الدم البيضاء في مواقع الالتهاب الحاد. - من المعروف أن RANTES يتفاعل مع أربعة مستقبلات مقترنة بالبروتين G عبر الغشاء السبعة: CCR1، CCR3، CCR4، وCCR5 (22-25). يمكن أن يؤدي تحفيز RANTES إلى بدء مجموعة متنوعة من مجموعات الإشارات التي تعتمد على سياق الخلية. على سبيل المثال، في الخلايا التائية، يمكن لـ RANTES تحفيز ارتفاعات Ca2+ داخل الخلايا، وتنشيط كيناز الالتصاق البؤري (FAK)، والبروتين كيناز A، وPI3-كيناز، وRho GTPase، ومسارات إشارات JAK/STAT. يُظهر بروتين الفيروس المضخم للخلايا US28 تماثلًا كبيرًا مع مستقبلات CC chemokine وهو قادر على ربط RANTES. يمكن للغشاء الممتد على US28، اعتمادًا على السياق، الإشارة بطريقة تأسيسية، وربط RANTES وبدء سلسلة إشارات بوساطة G-بروتين، أو عزل RANTES وربما تغيير الاستجابات الالتهابية.
مستقبل RANTES CCR5 هو أيضًا المستقبل المشارك الأساسي لمتغيرات R5 (M-tropic) لفيروس نقص المناعة البشرية-1. لقد ثبت أن RANTES، بالإضافة إلى بروابط CCR5 الأخرى، البروتين الالتهابي البلاعم (MIP)-1 ألفا وMIP-1 بيتا، يمكن أن يمنع تفاعل CCR5/HIV-1 بشكل تنافسي ويقمع العدوى الفيروسية في المختبر. ومن الواضح أن هذه التأثيرات لا تتطلب إشارات سليمة تمامًا من مستقبل CCR5. ونتيجة لذلك، فإن الأشكال المعدلة من RANTES والمركبات غير الببتيدية التي تمنع تفاعل فيروس نقص المناعة البشرية - 1 مع CCR5 تظهر نتائج واعدة للعلاجات المستقبلية. في المقابل، تظهر العديد من التقارير أن RANTES يمكن أن يعزز النسخ المتماثل في المختبر لمتغيرات X4 (T-tropic) من فيروس نقص المناعة البشرية-1 التي تستخدم CXCR4 كمستقبل مشارك بدلاً من CCR5. يتطلب هذا النشاط عادةً تركيزات RANTES عالية نسبيًا (~ μM) ويعتمد على التفاعل مع GAGs على سطح الخلية، واحتكار القلة، وتفعيل شلالات إشارات التيروزين كيناز وMAP كيناز.
RANTES هو جاذب كيميائي قوي لعدد من أنواع الخلايا المختلفة بما في ذلك خلايا الذاكرة التائية CD4+/CD45RO+ غير المحفزة وخلايا CD4+ وCD8+ T المحفزة ذات الأنماط الظاهرية الساذجة والذاكرة، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا القاعدية، والحمضات، والخلايا الجذعية، والخلايا البدينة، والخلايا الوحيدة، والخلايا الدبقية الصغيرة. بالإضافة إلى آثاره على الهجرة، يمكن لـ RANTES تنشيط عدد من أنواع الخلايا بما في ذلك الخلايا التائية، والخلايا الوحيدة، والعدلات، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا الجذعية، والخلايا النجمية. يتطلب تنشيط الخلايا التائية عمومًا تركيزات RANTES عالية نسبيًا (~ 1 ميكرومتر) ويعتمد على تجميع الجزيء والارتباط مع جليكوسامينوجليكان سطح الخلية (GAGs). ما إذا كان هذا [فقد بعض الكلمات، ربما "يحدث النشاط في الجسم الحي"] لا يزال غير واضح على الرغم من أن طفرات RANTES المحقونة داخل الصفاق والتي لا تستطيع تجميع و/أو ربط GAG، غير قادرة على جذب كريات الدم البيضاء عند مقارنتها بعناصر التحكم من النوع البري. تظهر دراسات أخرى أجريت على الجسم الحي أن فئران RANTES بالضربة القاضية تظهر نقصًا في تجنيد خلايا الدم البيضاء في مواقع الالتهاب الحاد. - من المعروف أن RANTES يتفاعل مع أربعة مستقبلات مقترنة بالبروتين G عبر الغشاء السبعة: CCR1، CCR3، CCR4، وCCR5 (22-25). يمكن أن يؤدي تحفيز RANTES إلى بدء مجموعة متنوعة من مجموعات الإشارات التي تعتمد على سياق الخلية. على سبيل المثال، في الخلايا التائية، يمكن لـ RANTES تحفيز ارتفاعات Ca2+ داخل الخلايا، وتنشيط كيناز الالتصاق البؤري (FAK)، والبروتين كيناز A، وPI3-كيناز، وRho GTPase، ومسارات إشارات JAK/STAT. يُظهر بروتين الفيروس المضخم للخلايا US28 تماثلًا كبيرًا مع مستقبلات CC chemokine وهو قادر على ربط RANTES. يمكن للغشاء الممتد على US28، اعتمادًا على السياق، الإشارة بطريقة تأسيسية، وربط RANTES وبدء سلسلة إشارات بوساطة G-بروتين، أو عزل RANTES وربما تغيير الاستجابات الالتهابية.
مستقبل RANTES CCR5 هو أيضًا المستقبل المشارك الأساسي لمتغيرات R5 (M-tropic) لفيروس نقص المناعة البشرية-1. لقد ثبت أن RANTES، بالإضافة إلى بروابط CCR5 الأخرى، البروتين الالتهابي البلاعم (MIP)-1 ألفا وMIP-1 بيتا، يمكن أن يمنع تفاعل CCR5/HIV-1 بشكل تنافسي ويقمع العدوى الفيروسية في المختبر. ومن الواضح أن هذه التأثيرات لا تتطلب إشارات سليمة تمامًا من مستقبل CCR5. ونتيجة لذلك، فإن الأشكال المعدلة من RANTES والمركبات غير الببتيدية التي تمنع تفاعل فيروس نقص المناعة البشرية - 1 مع CCR5 تظهر نتائج واعدة للعلاجات المستقبلية. في المقابل، تظهر العديد من التقارير أن RANTES يمكن أن يعزز النسخ المتماثل في المختبر لمتغيرات X4 (T-tropic) من فيروس نقص المناعة البشرية-1 التي تستخدم CXCR4 كمستقبل مشارك بدلاً من CCR5. يتطلب هذا النشاط عادةً تركيزات RANTES عالية نسبيًا (~ μM) ويعتمد على التفاعل مع GAGs على سطح الخلية، واحتكار القلة، وتفعيل شلالات إشارات التيروزين كيناز وMAP كيناز.
بيانات نموذجية
| صفحة / مل | التطوير التنظيمي | متوسط | تصحيح | |
| 0.00 | 0.0151 | 0.0162 | 0.0157 | |
| 13.72 | 0.0271 | 0.0288 | 0.0280 | 0.0123 |
| 41.15 | 0.0489 | 0.0496 | 0.0493 | 0.0336 |
| 123.46 | 0.1175 | 0.1189 | 0.1182 | 0.1025 |
| 370.37 | 0.3486 | 0.3520 | 0.3503 | 0.3346 |
| 1111.11 | 1.0108 | 0.9250 | 0.9679 | 0.9522 |
| 3333.33 | 1.8759 | 2.0533 | 1.9646 | 1.9489 |
| 10000.00 | 3.2985 | 3.1585 | 3.2285 | 3.2128 |
الدقة
| داخل - دقة الفحص | بين - دقة الفحص | |||||
| رقم العينة | S1 | S2 | S3 | S1 | S2 | S3 |
| 22 | 22 | 22 | 6 | 6 | 6 | |
| متوسط (جزء/مل) | 426.6 | 1631.6 | 3396 | 702.2 | 3412 | 8842.1 |
| الانحراف المعياري | 37.6 | 128.2 | 288.6 | 44.6 | 194.4 | 506.5 |
| معامل التغير(%) | 8.8 | 7.9 | 8.5 | 6.4 | 5.7 | 5.7 |
الدقة داخل الاختبار (الدقة داخل الاختبار) تم اختبار ثلاث عينات ذات تركيز معروف عشرين مرة على لوحة واحدة لتقييم دقة الاختبار داخل الاختبار.
الدقة بين المقايسات (الدقة بين المقايسات) تم اختبار ثلاث عينات ذات تركيز معروف ست مرات على لوحة واحدة لتقييم دقة المقايسة.
سبايك الانتعاش
تم تقييم تعافي الارتفاع عن طريق وضع 3 مستويات من CCL5 البشري في عينة مصل بشري صحي. تم استخدام المصل غير المسنن كفارغ في هذه التجربة.
وتراوحت نسبة التعافي من 90% إلى 106% مع متوسط استرداد إجمالي قدره 97%.
وتراوحت نسبة التعافي من 90% إلى 106% مع متوسط استرداد إجمالي قدره 97%.
قيم العينة
| مصفوفة العينة | تم تقييم العينة | النطاق (جزء/مل) | قابل للاكتشاف (%) | متوسط الكشف (جزء/مل) |
| مصل | 30 | 943.0-38560.8 | 100 | 21207.7 |
المصل/البلازما - تم تقييم ثلاثين عينة من متطوعين يتمتعون بصحة جيدة للتأكد من وجود CCL5 في هذا الاختبار. لم تكن هناك سجلات طبية متاحة للجهات المانحة.
منتجات جديدة
